Серологический анализ

Назначение

Назначение серологических методов исследования в медицинской практике обширно и разнообразно. Одним из основных целей является диагностика инфекционных заболеваний. Серология позволяет выявлять наличие антител к различным микроорганизмам, таким как вирусы, бактерии и другие возбудители, что существенно облегчает определение присутствия или предыдущего контакта с инфекцией.

Еще одним важным направлением использования серологических методов является мониторинг и контроль за ходом лечения инфекционных заболеваний. Путем регулярного измерения уровня антител в сыворотке можно оценить эффективность применяемых терапевтических методов и корректировать лечебные схемы в зависимости от динамики результатов.

В области ревматологии и аутоиммунных заболеваний серологические исследования играют решающую роль в постановке диагноза. Определение наличия определенных антител может свидетельствовать о наличии конкретных аутоиммунных процессов, что является важным ведущим фактором при разработке лечебных стратегий.

Классификация тестов по типу применяемого антигена. Трепонемные и нетрепонемные тесты на сифилис

В современной венерологии для диагностических целей используется более десятка вариантов серологических реакций на сифилис, которые можно подразделить по разным критериям на различные категории. Классификацию проводят по методологии проведения исследований, области применения, скорости, дешевизне, требованиям к лабораторной оснащенности и т.д.

По типу используемых антигенов, диагностические тесты традиционно разделяют на две группы— нетрепонемные и трепонемные серологические тесты.

Трепонемные реакции теоретически более специфичны, однако они также дают ложноположительные результаты. Более того, они не позволяют дифференцировать нелеченный и излеченный сифилис. Результаты трепонемных реакций будут положительными в обоих случаях. Нетрепонемные реакции позволяют различать нелеченную или недавно перенесенную и излеченную инфекцию.

При обследовании рекомендуется проводить и трепонемную, и нетрепонемную реакции. Для установки и подтверждения диагноза «сифилис» требуются положительные результаты при проведении тестов обоих типов — трепонемных и нетрепонемных. Поэтому нетрепонемные тесты применяются в комбинации с трепонемными тестами, и проводятся до начала, в процессе и после окончания лечения в определенные временные интервалы.

1. Нетрепонемные тесты

Наиболее известные из нетрепонемных тестов с визуальной расшифровкой результатов — это

RW — реакция Вассермана с липидными антигенами (реакция связывания комплемента с кардиолипиновым антигеном, РСКк)
реакция Канна (не используется в настоящее время),
цитохолевая реакция Закс-Витебского (не используется в настоящее время),
микрореакция преципитации с плазмой или инактивированной сывороткой (МРП или РМП),
RPR (тест быстрых плазменных реагинов, Rapid Plasma reagin),
TRUST (тест с толуидиновым красным и непрогретой сывороткой, Toluidin Red Unheated Serum Test).

Среди нетрепонемных тестов имеются 2 теста с микроскопическим считыванием результатов реакции:

1. VDRL — (Venereal Disease Research Laboratory);

2. USR — тест определения активных реагинов плазмы (Unheated Serum Reagins).

Реактивность в нетрепонемных тестах обычно указывает на повреждение тканей и не всегда специфична в отношении сифилиса. Простота выполнения и низкая стоимость позволяет использовать их как отборочные реакции при установлении предварительного диагноза сифилиса.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются специфические антигены трепонем. Эти тесты обязательны для подтверждения диагноза (РПГА, РИТ, РИФ и ИФА). Они являются более сложными и дорогостоящими, чем тесты 1-й группы, но и более специфичными и чувствительными. Выявление антител в спинно-мозговой жидкости также производится с помощью трепонемных тестов.

Традиционные трепонемные реакции, подтверждающие диагноз сифилиса, требуют дорогого лабораторного оборудования и опытного персонала, поэтому они редко проводятся вне специализированных лабораторий. Однако сейчас их можно заменить простыми и быстрыми трепонемными реакциями, которые возможно проводить на местах и в которых используется цельная кровь

Проведение этих реакций не требует длительного обучения, специальных условий для хранения реактивов и оборудования.

Сравнительная дешевизна, удобство и практичность трепонемных экспресс- реакций привлекают к ним внимание не только как к методам подтверждения диагноза. Эти реакции могут применяться для скрининга сифилиса в рамках оказания первичной медицинской помощи (их можно проводить на местах, в том же лечебно-профилактическом учреждении) или в районах, где лаборатории не доступны

Однако поскольку антитела к T. pallidum определяются на протяжении ряда лет независимо от того, лечился больной или нет, трепонемные экспресс-реакции нельзя использовать для оценки эффективности лечения и дифференциальной диагностики нелеченного и излеченного сифилиса.

ИФА — иммуноферментный анализ и РПГА — реакция пассивной гемагглютинации

Иммуноферментный анализ (ИФА) и реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) – новые высокочувствительные и высокоспецифичные, удобные в постановке (с возможностью автоматизации), хорошо воспроизводимые, недорогие методы серологической диагностики сифилиса.
ИФА по механизму реакции, чувствительности и специфичности близок к РИФ. В обеих реакциях принимают участие одни и те же антитела. При ИФА для визуализации реакции антиген-антитело используют реакцию фермента (щелочная фосфатаза или пероксидаза хрена) с субстратом, который при этом меняет свою окраску. Интенсивность окраски определяет позитивность реакции (от + до ++++). Благодаря автоматизации, этот тест можно применять для скрининга на сифилис больших групп обследуемых: беременных, доноров, больных психоневрологических и кардиологических стационаров и др. Возможна постановка ИФА с ликвором. В настоящее время планируется замена комплекса КСР на сочетание РМП и ИФА.

Результаты ИФА (как и РИФ) становятся положительными в первые дни первичного периода или в конце инкубации и остаются положительными во всех периодах.

При постановке ИФА возможно выявление суммарных антител и дифференцированное определение трепонемоспецифических IgM и IgG. IgM появляются в крови больных лишь в первые недели и месяцы болезни, а затем – исчезают. Поэтому, их выявление при ИФА свидетельствует о наличии ранних нелеченых форм сифилиса, раннего врожденного сифилиса, реинфекции. При выявлении IgG принципиальным является их количество, что отражается с помощью коэффициента позитивности (порядок величин этого показателя варьирует при применении разных тест-систем).

При РПГА в качестве антигена используются заформалиненные эритроциты барана, покрытые антигенами патогенных бледных трепонем. При добавлении к этим эритроцитам сыворотки, содержащей специфические антитела, происходит их агглютинация.

Результаты РПГА оценивают как реактивные, слабореактивные и нереактивные.

Помимо качественного исследования, во всех тест-системах предусмотрен количественный анализ с определением титра. Как и ИФА, РПГА проста в исполнении, не требует высокой квалификации персонала и специального оборудования, возможна ее автоматизация.

РПГА становится положительной уже в инкубационном периоде и может оставаться таковой спустя много лет после выздоровления (не может использоваться для контроля излеченности). По чувствительности и специфичности РПГА не уступает, а при поздних формах и врожденном сифилисе даже превосходит РИФ и РИБТ.

ЛПР при постановке ИФА и РПГА бывают редко и возможны при трепонематозах (фрамбезия, беджель, пинта), коллагенозах, циррозе печени, лимфосаркоме, инфекционном мононуклеозе, лепре, а также у беременных. Ложноотрицательные результаты возможны у ВИЧ-инфицированных пациентов.

Разрабатываются новые высокоспецифичные методы серологической диагностики сифилиса, такие как иммуноблотинг, IgM-серология и др.

Август Пауль фон Вассерман (Wassermann, August von) (1866–1925), немецкий микробиолог и иммунолог.

Трепонемные и нетрепонемные тесты

1. Нетрепонемные тесты служат для выявления антител к нетрепонемным антигенам.

Распространенные нетрепонемные тесты — это липидные (реагиновые) реакции. Эти тесты связаны не с определением антител против трепонемы, но с определением антител IgM и IgG к липоидным материалам из разрушенных клеток организма больного сифилисом. Чаще всего эти тесты применяются для скрининга из-за простоты и дешевизны. В них используется нетрепонемный кардиолипиновый антиген, а сами тесты проводятся в разных вариантах:

1) флокуляционные тесты (продукт реакции выпадает в виде хлопьев): микрореакции на стекле с липидными антигенами —экспресс-метод диагностики (микрореакции преципитации — РМП), VDRL (Venereal Disease Research Laboratory test), RPR (Rapid Plasma Reagin test) и др.;

2) реакция связывания комплемента (РСК) с липидными антигенами — реакция Вассермана (РСКк);

3) осадочные реакции, которые не используются в настоящее время (реакция преципитации Кана, цитохолевая реакция Закса — Витебского и др.).

2. Трепонемные тесты — выявление антител к трепонемным антигенам.

В трепонемных тестах чаще всего используются антигены Treponema pallidum, нативные (штамм Никольса) или рекомбинантные. Тест, в котором используются живые спирохеты — реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ), в настоящее время выводится из клинической практики из-за дороговизны и сложности.

Групповые антигены являются общими для двух или более видов микробов, входящих в один род, а иногда относящихся и к разным родам. Специфические антигены имеются только у данного вида микроба или даже только у определенного типа либо подтипа внутри вида. Определение специфических антигенов позволяет дифференцировать микробы внутри рода, вида, подвида и даже типа (подтипа).

Групповые трепонемные реакции определяют антитела к групповым трепонемным антигенам:

1) РСК с протеиновым антигеном Рейтера;

2) реакция иммунофлюоресценции (РИФ);

3) реакция иммунного прилипания (РИП).

Видоспецифичные протеиновые трепонемные реакции определяют антитела к специфическим видовым антигенам Treponema pallidum:

1) реакция иммобилизации бледных трепонем (РИТ или РИБТ);

2) РСК с кардиолипиновым антигеном и с трепонемным ультраозвученным антигеном (РСКт).

3) РИФ-Абс. и ее варианты (IgM-FTA-ABS, 19S-IgM-FTA-ABS, и др.);

4) реакция непрямой гемагглютинации бледных трепонем (РПГА) или агглютинации латексных частиц;

5) иммуноферментный анализ (ИФА);

6) иммуноблоттинг (Вестерн-блот и лайн-блот).

В связи с наличием длительных латентных периодов заболевания и неспецифическим характером нетрепонемных тестов, при проведении скрининговых исследований все чаще используются тесты, основанные на определении специфических антител против трепонемы в пробах крови.

Гистоморфологические методы.

В исследовательских целях, при сифилитических поражениях, проводятся микроскопические исследования образцов пораженных тканей (твердого шанкра, сифилидов). В настоящее время, для диагностики сифилиса гистологические исследования используются редко, т.к. дифференциальная диагностика гистологических изменений представляет серьезные трудности. При трактовке гистоморфологических изменений в каждом конкретном случае необходимо обязательно учитывать клинические и лабораторные данные.

Расшифровка результатов серологического анализа

При расшифровке полученного ответа учитывают класс антител:

IgM, антитела класса М указывают на недавнее заражение, острую фазу инфекции;
IgG, антитела класса G появляются через 3-4 недели после заражения и при большинстве инфекций остаются пожизненно, также они образуются после вакцинации;
IgA, антитела класса А определяют не для всех инфекций, а только для тех, которые поражают дыхательные пути или кишечник.

К серологическим маркерам инфекций относят авидность. Этот показатель отражает силу связывания антител с антигенами. Чем выше уровень авидности, тем более давним является инфицирование. Высокая авидность наблюдается при хронических инфекциях, бессимптомном носительстве.

Активность инфекции показывает титр — количество разведений сыворотки, в которых обнаруживаются иммунные комплексы. Например, для токсокароза титр 1:200 указывает на носительство паразита, но не на болезнь. Об активном токсокарозе говорят, если определяется титр 1:800 и выше. Серология — это метод диагностики инфекционных заболеваний. Существует много методик, определяющих иммунные комплексы, иммуноглобулины или антигены микробов. Для каждой инфекции информативным будет свой серологический метод.

Не занимайтесь самолечением, обратитесь к врачу! Будьте здоровы.

Процесс сдачи анализа

Забор венозной крови на серологическое исследование осуществляется в первой половине дня. Пациенту следует заблаговременно приехать в лабораторию, взяв с собой необходимые документы (паспорт и направление на анализ).

Пациенту предлагают пройти в процедурный кабинет и удобно расположиться на кресле. Взятие крови осуществляют из вены, которая находится в области локтевого сгиба, поэтому необходимо освободить предплечье и локтевую зону от вещей. На плечо накладывается жгут, а под руку подкладывают подушку. Медицинская сестра надевает одноразовые стерильные перчатки и обрабатывает место пункции ватным тампоном, смоченным в дезинфицирующем средстве.

Алгоритм проведения венозной инъекции включает в себя нагнетание крови в вену, для этого пациента просят несколько раз сжать и разжать кулак. Сосуд при этом лучше визуализируется и прощупывается, что облегчает забор материала. Затем медсестра вводит иглу шприца в вену, берет 10 миллилитров крови и наклеивает на место инъекции бактерицидный пластырь. Чтобы избежать образование гематомы, после манипуляции следует согнуть руку в локте на 15-20 минут.

Особенности проведения серологического анализа крови

Серологический анализ крови проводится для того, чтобы узнать, болеет ли человек определенными инфекционными заболеваниями или он абсолютно здоров. Серологическое исследование делают в лаборатории, после выдается расшифровка. Изучение позволяет выяснить, насколько далеко зашла болезнь, определить стадию заболевания. Определение процедуры и подробное описание этапов анализа освещает википедия.

Анализ крови на антитела показан при большом количестве заболеваний. Речь идет о редких и широко распространенных недугах. Известно, что антитела и антигены способны взаимодействовать. Именно эту особенность врачи и используют, проводя исследование.

Если человек болеет, происходит образование иммунных защитных комплексов. Врач, проводя исследование, добавляет антиген или антитело, а потом наблюдает за реакцией. Именно так становится понятно, какая инфекция присутствует в организме. После этого можно смело начинать лечение.

Серологический анализ крови выполняется следующим образом. Врач берет антиген возбудителя заболевания, добавляет его в сыворотку. В результате манипуляций начинается химическая реакция. Врач производит оценку и выдает результат.

Часто возникает ситуация, при которой события развиваются противоположным образом. Речь идет о том, чтобы определить, какое заболевание у человека. Сделать это можно по имеющимся антигенам. Чтобы их выявить, врач берет антитела и добавляет их в кровь.

Если необходимо узнать, какая группа крови у человека, также сдают материал

Врачи обращают пристальное внимание на то, какова свертываемость крови. Возможно, при исследовании будет выявлено отклонение от нормы, тогда, если не начать лечение, последствия могут быть плачевными

Речь идет не только о тромбозе, у человека возможен инфаркт

Кроме того, повышается вероятность инсульта

Речь идет не только о тромбозе, у человека возможен инфаркт. Кроме того, повышается вероятность инсульта.

Как подготовиться к анализу?

Если вы желаете пройти исследование, то помните о том, что это надо сделать натощак. Анализ крови берут в лабораториях. То, как протекает реакция, врач определяет, используя сыворотку крови. Именно по ней можно понять, как взаимодействуют антигены и антитела. Полученная информация позволяет представить полную картину. Врач, опираясь на результат исследования, назначит наиболее эффективное лечение. Поэтому, если есть возможность, обязательно сдайте материал.

Соблюдайте диету хотя бы в день, предшествующий дню сдачи материала. Не ешьте жирного, сладкое также стоит исключить. Не съедайте слишком много пищи за раз. Алкоголь полностью исключите. Кроме того, не стоит изнурять себя физическими нагрузками. Поскольку стресс может стать причиной искажения результатов, избегайте его перед тем, как сдавать анализ крови.

Какие заболевания определяет анализ?

Если вы думаете, что у вас лямблии, амебиаз, то смело обращайтесь в лабораторию. Исследование материала покажет, если человек болен токсоплазмозом, описторхозом и рядом других заболеваний. Антитела станут сигналом к тому, что стоит начать лечение.

Данное обследование назначают для беременных, при подозрении на сердечно-сосудистую патологию. Варикозное расширение вен, аутоиммунные заболевания — все это показания для проведения исследования.

Кроме того, исследование делают:

после лечения;
до и после операции;
для оценки эффективности лечения.

В урологии и венерологии исследование делают чаще всего.

Что называют нормой?

Если по результатам видно, что антител нет, то это очень хорошо. Инфекция отсутствует. Но такое случается редко, особенно если раньше были все симптомы, указывающие на наличие заболевания. Как правило, серологический анализ часто становится последним подтверждением диагноза.

Обычно анализ крови на антитела делают два раза. Сначала просто определяют, есть ли инфекция. Второй раз анализ на антитела сдают для того, чтобы понять, насколько динамично идет процесс. Если количество связей между антителами и антигенами увеличилось, то идет заражение. Для того чтобы правильно выбрать лечение, врач должен получить больше информации. В такой ситуации проводятся дополнительные химические реакции. Так можно понять, с какой болезнью придется бороться. Кроме того, так определяется стадия болезни.

Результат исследования крови на антитела может быть только повышенным. Нормой является значение на отметке «ноль». Именно по этой причине результат не может быть пониженным.

Преимущества и недостатки

К главным достоинствам иммуноферментного анализа крови относятся:

Возможность выявления наличия в организме пациента патологии на ранних стадиях.
Постоянный контроль за развития болезни.
Быстрота и точность получаемого результата.
Отсутствие необходимой подготовки больного к исследованию и финансовая доступность метода.

К недостаткам данного метода лабораторной диагностики можно отнести получаемый в редких случаях ложноотрицательный анализ, что влечёт за собой необходимость периодического контрольного тестирования.

Взятие крови для диагностики

Широкое применение иммуноферментный анализ крови получил при диагностике вирусных заболеваний, урогенитальных инфекций, патологии эндокринной системы, онкологии, аллергологии и многих других заболеваний. Этот метод также востребован при проведении анонимного исследования на наличие ВИЧ, сифилиса и гепатита С

Это особенно важно при наличии явно неблагоприятной эпидемиологической обстановки с этими заболеваниями в стране и в мире

Хотелось бы надеяться, что наши медики продолжат широко использовать и усовершенствовать такой необходимый для широкого круга больных метод лабораторной диагностики.

Серологическое исследование на гепатит, ВИЧ, сифилис: особенности

Сифилис

. При проведении анализа на сифилис специалисты ищут белки, отвечающие за поступление в человеческий организм возбудителя инфекции — речь идет о трепонеме бледной. В качестве биологического материала в этом случае выступает сыворотка крови.

.

Вирусные гепатиты — серьезные инфекционные заболевания, опасность которых заключается в том, что они достаточно долгое время могут жить в организме, никак себя не проявляя. Выявить заболевание в ранней фазе, когда оно лучше поддается лечению, можно проведя анализ на маркеры — маркеры появляются в крови после перенесенного заболевания или введения вакцины.

Рекомендуем к просмотру медицинский сайт https://tabletix.ru/ . На сайте найдете полезную информацию, врачебные мнения.Если вы наблюдаете один или несколько из симптомов, указанных ниже, стоит задуматься о сдаче серологического анализа:

рвота;
плохой аппетит или его отсутствие;
беспричинное бессилие организма, переутомление;
желтоватый цвет лица;
изменения цвета кала и мочи.

ВИЧ.

Если показал положительный результат, это не говорит о том, что пациент инфицирован СПИДом. Если заражение произошло недавно (не более двух месяцев назад), наличие антител не позволяет определить факт развития заболевания. Назначается повторное исследование.

Серологический анализ крови
— важнейший метод исследования, основное назначение которого заключается в оперативном выявлении вирусов, инфекций, микробов в организме.

Этот уникальный лабораторный «инструмент» позволяет определить любое заболевание, которое является следствием угнетения иммунитета, поэтому не ленитесь, а регулярно сдавайте анализ, чтобы иметь возможность вовремя выявить болезнь и быстро от нее избавиться.

8 134

Серологический анализ крови представляет собой фундаментальный метод исследования, осуществляемый в целях быстрого и достоверного выявления микробов, инфекций и вирусов в организме человека. Помимо этого благодаря данному методу можно определить весь перечень существующих болезней, возникших в результате понижения иммунитета.

За счет серологического анализа осуществляется изучение забранной у пациента крови на ВИЧ, сифилис и иные опасные недуги.
К тому же исследование необходимо в случае утверждения группы крови пациента и для определения специфичности белков.

Как отмечалось ранее, анализ рекомендован для диагностирования инфекционных недугов и установления стадии течения воспалительного процесса. Благодаря серологической химической реакции можно определить уровень взаимодействия антигенов и антител, отвечающих за результат.

Данный анализ применяется:

При определении числа антител, борющихся с возбудителем заболевания: в ходе анализа сыворотку крови смешивают с антигеном возбудителя болезни, после чего смотрят на происходящую реакцию.
Обратная ситуация – развивающуюся инфекцию обнаруживают за счет находящихся антигенов, выявляемых путем дополнения в кровь антител.
В случае установления группы крови.

При плохой свертываемости крови и в случае гиперкоагуляции могут произойти опасные последствия, связанные с сердечной деятельностью.

Необходимость в серологических исследованиях возрастает, когда у пациента есть подозрения на наличие половой инфекции и других заболеваний. В полученном результате пройденного анализа есть информация о наличии в крови антител к данному типу бактерий либо вирусов. Это болезни печени, корь, вирус иммунодефицита человека, герпес и др. В случае выявления антител доктор выносит заключение пациенту и определяет дальнейший курс терапии. Если есть необходимость, нужно будет пройти дополнительные исследования.

Забор материала осуществляется из локтевой вены. Анализ берется на голодный желудок с утра. Вместе с тем перед сдачей биохимического анализа на гепатит следует исключить из ежедневного рациона все овощи и фрукты, имеющие яркую окраску. Если потребуется подтверждение результатов готового анализа, можно назначить вторичное обследование без спецподготовки.

Реакция флюоресценции

Один из видов серологических реакций флюоресценция или РИФ. Этот метод исследования проводится с использованием реагента, который подсвечивает искомые антитела в сыворотке крови. Для постановки серологической реакции прямого типа или ПИФ специфические антитела помечаются флюоресцирующим веществом. Это самый быстрый тип исследований, который проводится в один этап.

Другой способ, который называется непрямым или РНИФ, проводится в 2 стадии. На первой специфические клетки (антитела) не имеют флюоресцирующих меток, а на второй используются соответствующие меченые антитела для выявления комплекса антиген-антитело. Реакция свечения появляется только после связи со специфическим антителом. Результат манипуляций оценивается специальным прибором, который оценивает интенсивность излучения, а также определяет форму и размер исследуемых объектов. Инфекционный агент определяется с достоверностью 90-95% в зависимости от типа и стадии заболевания.

Сущность методов, их преимущества и недостатки

Существует несколько серологических методов диагностики, но принцип их применения сводится к одному – к реакции “антиген-антитело”. Это основывается на том, что антиген инфекционного возбудителя, если он есть в крови обследуемого, обязательно даст специфическую реакцию на соответствующее антитело в контрольной (диагностической) сыворотке крови. И наоборот, антитело, если оно есть в крови обследуемого, даст реакцию на контрольный антиген, содержащийся в диагностикуме лаборанта.

Серологические анализы имеют существенные достоинства в диагностике многих заболеваний, а именно:

доступность и охват исследованиями широких масс населения,
относительная простота методик,
умеренная стоимость большинства исследований,
быстрота выполнения анализа (три-пять рабочих дней).

Тем не менее, у серологических исследований имеются и некоторые недостатки, например, необходимость инвазивного вмешательства при заборе крови, а что существеннее – в некоторых случаях невозможность отличить уже перенесенную инфекцию от текущей болезни.

Итак, из серологических исследований крови выделяют следующие методики:

Реакция агглютинации (РА), чаще используется реакция не прямой, или пассивной агглютинации (РПГА). Основывается на поиске антигена (в данном случае, агглютиногена) в биологической жидкости пациента, или на поиске антител (агглютининов) в исследуемой сыворотке крови. Может применяться не только в диагностике инфекционных заболеваний, но и в определении ревматоидного фактора (РФ), а также в определении группы крови.
Реакция связывания комплемента (РСК).
Иммуноферментный анализ (ИФА).
Реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

РПГА

РПГА выполняется следующим образом. Исследуется сыворотка крови пациента, в которой осуществляется поиск антигена или антител с помощью антительного или антигенного диагностикума, соответственно. При этом контрольные антитела или контрольные антигены фиксируются на эритроцитах барана или на частичках латекса размером не более 5-ти мкм. В том случае, если в крови выявляются искомые антитела или антигены, с контрольным диагностикумом происходит реакция агглютинации (склеивания), которую можно оценить визуально по наличию хлопьев или комочков в прозрачной среде диагностикума.

РСК

Отличие РСК заключается в следующем. Для поиска антител в исследуемой сыворотке крови к тому или иному антигену используется диагностикум, содержащий не только эритроциты барана, но еще и свободный комплемент. Комплемент- это белковый комплекс, способный активировать мембраноатакующий компонент. Эритроциты же сенсибилизированы собственными к ним антителами, поэтому здесь два пути развития событий. Первый – если антитела, допустим, к возбудителю коклюша у пациента в крови циркулируют, то система комплемента будет направлена на ликвидацию этих только что образовавшихся комплексов “антиген-антитело”, а эритроциты барана останутся нетронутыми. Гемолиза эритроцитов барана не произойдет – диагностикум останется прозрачным, с небольшим осадком на дне из эритроцитов барана. РСК положительная (гемолиза нет).

И второй путь – антител к коклюшу в крови пациента нет, тогда системе комплемента придется связать комплекс “антиген-антитело” на эритроцитах барана. В этом случае будет гемолиз эритроцитов барана, визуально это выглядит, как прозрачная однородная красно-оранжевая лаковая кровь. РСК отрицательная (гемолиз есть).

ИФА

Для проведения ИФА используются те же самые диагностикумы, но меченые ферментами (щелочная фосфатаза, пероксидаза и др). Таким образом, на положительные комплексы “антиген – антитело” формируется реакция, результат которой с легкостью можно визуально оценить на специфических тест-системах. Преимущество ИФА в том, что результат готов уже через несколько дней, и даже часов – это экспресс-диагностика (чаще применяется при экспресс диагностике ВИЧ – инфекции).

РИФ

РИФ отличается от предыдущих методик тем, что в последнем случае антитела к определенным возбудителям помечаются флюоресцентными веществами. При рассмотрении исследуемых образцов ткани пациента, обработанных мечеными антителами, в люминисцентном микроскопе образуемые комплексы “антиген – антитело” светятся, значит, реакция положительная.